Verbesserung der intestinalen Barrierefunktion durch Postkonditionierung des Ganglion stellatum-Blocks via Hemmung der Autophagie bei wachen Ratten nach hämorrhagischem Schock und Reanimation
Der hämorrhagische Schock ist ein kritischer pathologischer Zustand, der durch Mikrozirkulationsstörungen und Hypoperfusion gekennzeichnet ist und zu schwerer Zellschädigung sowie Organfunktionsstörungen führt. Eine zentrale Komplikation ist die intestinale Barrierestörung, die zur Schädigung entfernter Organe beiträgt. Frühere Studien zeigten, dass eine prophylaktische Behandlung mit einem Ganglion stellatum-Block (SGB) die durch hämorrhagischen Schock induzierte Darmbarriereschädigung reduziert. Die potenziellen Vorteile einer SGB-Postkonditionierung nach hämorrhagischem Schock bleiben jedoch unklar. Diese Studie untersucht die Auswirkungen einer SGB-Postkonditionierung auf die Darmbarrierefunktion und die zugrundeliegenden Mechanismen im Zusammenhang mit Autophagie bei wachen Ratten nach hämorrhagischem Schock und Reanimation.
Methodik
Achtundachtzig gesunde männliche Wistar-Ratten (300 ± 20 g) von SiPeiFu Biotechnology Co., Ltd. (Peking, China) wurden verwendet. Chirurgische Eingriffe erfolgten unter Anästhesie, genehmigt durch die Tierethikkommission der Hebei North University. Der linke Ganglion stellatum wurde mit 0,5 % Ropivacain-Hydrochlorid blockiert; die Sham-SGB-Gruppe erhielt Kochsalzlösung. Ein waches hämorrhagisches Schockmodell wurde unter 2 % Isofluran-Anästhesie etabliert. Die Überlebensrate von 52 Ratten wurde über 72 Stunden analysiert (längerfristiges Überleben definiert als >72 Stunden). Weitere 36 Ratten dienten der Untersuchung der Darmbarriere und Autophagiemechanismen.
Ergebnisse
Die SGB-Postkonditionierung verbesserte die Überlebensrate signifikant: Die SGB+Schock-Gruppe wies höhere Überlebensraten im Vergleich zur reinen Schockgruppe nach 24 Stunden (92,3 % vs. 38,5 %), 48 Stunden (61,5 % vs. 30,8 %) und 72 Stunden (53,8 % vs. 23,1 %) auf. Die mediane Überlebenszeit betrug 17,5 Stunden (Schockgruppe) vs. 76,9 Stunden (SGB+Schock). Die Kaplan-Meier-Analyse bestätigte die Wirksamkeit von SGB.
Die intestinale Durchblutung war in der Schockgruppe signifikant reduziert (vs. Sham-Gruppe). SGB und 3-Methyladenin (3MA) erhöhten die Durchblutung, während Rapamycin (RAPA) die positiven Effekte von SGB aufhob. Morphologisch zeigte die Schockgruppe verdickte, verkürzte und irregular angeordnete Darmzotten. SGB oder 3MA reduzierten die Schäden, RAPA verstärkte sie in der SGB+Schock-Gruppe. Signifikante Unterschiede bestanden in Zottenhöhe, Submukosa- und Muskelschichtdicke. Der Darmgewebe-Nass/Trocken-Ratio war in der Schockgruppe erhöht und durch SGB/3MA reduziert, jedoch durch RAPA antagonisiert.
Die Fluorescein-Isothiocyanat-Dextran (FD4)-Permeabilität war in der Schockgruppe erhöht. SGB und 3MA senkten die FD4-Plasmakonzentration, während RAPA die Permeabilität in der SGB+Schock-Gruppe steigerte. Western-Blot-Analysen zeigten, dass SGB und 3MA die Expression der Tight-Junction-Proteine ZO-1, Occludin und Claudin-1 erhöhten, während RAPA diese Effekte blockierte.
Autophagie-Marker (LC3-II, Beclin-1) waren in der Schockgruppe hochreguliert, p62 war reduziert. SGB und 3MA normalisierten diese Expression, während RAPA die SGB-Wirkung aufhob. Dies deutet darauf hin, dass SGB die durch Schock induzierte Autophagie-Aktivierung hemmt.
Schlussfolgerung
Die SGB-Postkonditionierung verbessert das Überleben und die Darmbarrierefunktion nach hämorrhagischem Schock durch Hemmung exzessiver Autophagie. Die Ergebnisse legen nahe, dass SGB die intestinale Durchblutung steigert, morphologische Schäden reduziert und Tight-Junction-Proteine stabilisiert, wodurch die Barrierefunktion erhalten bleibt. Die Rolle der Autophagie unterstreicht das klinische Potenzial von SGB im Management des hämorrhagischen Schocks. Zukünftige Forschung sollte die breitere Anwendung von SGB und seine anti-schock-Mechanismen vertiefen.
doi.org/10.1097/CM9.0000000000001968